DISCUSSIONIn recent years, several

DISCUSSION
In recent years, several PARP inhibitors have been developed and subjected to clinical trials for the treatment of cancer [36-38]. Using PARP inhibitors as the synthetic lethal approach represents a powerful new strategy for therapeutic intervention [39, 40]. Recently Lin et al. showed that CtIP knockdown sensitized ovarian cancer cells to olaparib [32]. Here, we found that CtIP-depleted breast cancer cells show enhanced sensitivity to PARP inhibitors olaparib and veliparib. In agreement with an underlying defect in DDR, siRNA targeting CtIP caused a concomitant increase and persistence in γH2AX formation and impaired DNA damage-induced Rad51 foci formation. This suggested that the cause of PARP inhibitor sensitivity in cells depleted of CtIP might involve a defect in DNA end-resection, which led to dysfunctional HR. We further showed the double loss of 53BP1 and CtIP can result in resistance to a PARP inhibitor compared to the loss of CtIP. The CtIP deficiency caused severe HRR defect probably at the initiation process, and the 53BP1 deficiency under CtIP knockdown condition may have partially rescued HRR but have a defect in NHEJ repair. This condition thus resulted in a slightly lower survival compared with the 53BP1 deficiency alone, where NHEJ is defective but HR is active. This observation is consistent with the notion that 53BP1 cooperating with RIF1 and PTIP promotes NHEJ repair [41] and thus its absence negatively affects the sensitivity to a PARP inhibitor in MCF-7 cells.
The human CtIP is a nuclear protein which is widely expressed in various human tissues [42]. It is phosphorylated upon DNA damage (possibly by ATM/ATR), cooperates with the Mre11-Rad50-Nbs1 complex and BRCA1 in processing DSB broken ends [14,43, 44]. It promotes HR by initiating DSB end resection and the formation of ssDNA [30]. Finally RAD51–ssDNA nucleoprotein filament is formed to promote strand invasion and HR. In the absence of BRCA1 or CtIP, RAD51 binding to DSB sites and the HR process are interfered with, resulting in mutagenic DNA repair, genome instability, and tumorigenesis [45]. In CtIP-deficient mice, early embryonic lethality and shortened life span are observed with the development of multiple types of tumors [46]. Furthermore,CtIP deficiency was found to be associated with a significantly increased mutation rate in a screening study of colon cancers [47]. From a mutation screening of the CtIP gene in 89 human tumor cell lines, 5 missense and 11 silent mutations were found [48]. Meanwhile, it has been reported that CtIP protein level was frequently quite low in breast cancer cells, especially in estrogen receptor negative breast cancers [24]. Furthermore, a recent study showed that CtIP was also widely mutated in patients with myelodysplastic syndrome (MDS) and acute myeloid leukemia (AML) (MDS/AML) [49]. All these findings reveal that CtIP plays an important role in tumorigenesis.
In conclusion, CtIP is frequently downregulated in breast cancer cells and our studies revealed that the expression level of CtIPin breast cancer patients is correlated with overall survival. Loss of CtIP results in HRR defect, providing the rationale to investigate the clinical significance of CtIP and its potential use as a biomarker to the application of PARP inhibitors in breast cancer treatment.

Результаты (русский) 1:

ОБСУЖДЕНИЕВ последние годы несколько битор PARP разработаны и подвергнут клинические испытания для лечения рака [36-38]. С помощью битор PARP как синтетические смертоносных подход представляет мощную новую стратегию для терапевтической интервенции [39, 40]. Недавно Лин et al. показал, что CtIP нокдаун сенсибилизированных клеток рака яичников в olaparib [32]. Здесь мы обнаружили, что клеток рака молочной железы в исчерпаны CtIP Показать повышенной чувствительностью к ПАРП ингибиторов olaparib и veliparib. Согласна с основной дефект в DDR siRNA, ориентация CtIP вызвало сопутствующего увеличения и настойчивость в формировании γH2AX и формирование очагов повреждения индуцированной Rad51 ДНК. Это предполагает, что причиной ПАРП ингибитор чувствительность в исчерпаны из CtIP клетках могут быть связаны с дефектом в ДНК конец резекция, что привело к неблагополучных HR. Мы также показали, что двойной потери 53BP1 и CtIP может привести к сопротивление АБС битор PARP, по сравнению с потерей CtIP. CtIP, дефицит, вызвало серьезный дефект HRR вероятно на процесс посвящения и дефицит 53BP1 под CtIP нокдаун условие может иметь частично спасли HRR, но имеют дефект в NHEJ ремонт. Это условие таким образом привело к несколько ниже выживания, по сравнению с дефицитом 53BP1 только, где NHEJ дефектных но HR является активным. Это наблюдение согласуется с тем, что 53BP1 сотрудничает с RIF1 и PTIP способствует NHEJ ремонт [41] и таким образом его отсутствие негативно влияет на чувствительность к АБС битор PARP в клетками MCF-7.Человеческого CtIP — это ядерных белков, которая широко представлена в различных тканях человека [42]. Это фосфорилированных после повреждения ДНК (возможно, ATM/ATR), сотрудничает с Mre11-Rad50-Nbs1 комплекс и BRCA1 в обработке DSB сломанной концы [14,43, 44]. Это способствует HR, инициируя DSB конец резекции и формирование ssDNA [30]. Наконец RAD51 – ssDNA Нуклеопротеиды накаливания формируется для содействия прядь вторжения и HR. В отсутствие BRCA1 или CtIP являются мешал RAD51 привязки сайты ФСБ и процесс HR, приводит к мутагенным ремонта ДНК, нестабильность генома и tumorigenesis [45]. В CtIP недостаточным мышей ранних эмбриональных летальность и сократить продолжительность жизни наблюдаются с развитием различных типов опухолей [46]. Кроме того CtIP дефицит был найден ассоциироваться с коэффициентом значительно увеличили мутации в исследовании скрининга рака толстой кишки [47]. От скрининга мутации гена CtIP в 89 человека опухоли клеточных линий, 5 Миссенс и 11 немого мутации были найдены [48]. Тем временем сообщалось, что уровень протеина CtIP часто была довольно низкой в клеток рака молочной железы, особенно в эстроген рецептор негативные молочной железы [24]. Кроме того недавние исследования показали, что CtIP был также широко мутировали в больных с миелодиспластический синдром (MDS) и острый миелоидный лейкоз (ОМЛ) (MDS/ОМЛ) [49]. Все эти результаты показывают, что CtIP играет важную роль в tumorigenesis.В заключение CtIP, часто downregulated в клетках рака молочной железы и наши исследования показали, что уровень экспрессии CtIPin больных раком молочной железы связан с общей выживаемости. Потеря CtIP результаты в HRR дефект, обеспечивая обоснование исследовать клиническое значение CtIP и его возможного использования в качестве биомаркеров для применения ингибиторов ПАРП в лечении рака молочной железы.

Результаты (русский) 2:

ОБСУЖДЕНИЕ
В последние годы ингибиторы PARP несколько были разработаны и подвергали клинических испытаний для лечения рака [36-38]. Использование ингибиторов PARP, как синтетического подхода смертельной представляет собой мощный новую стратегию для терапевтического вмешательства [39, 40]. Недавно Лин и др. показали, что CTIP нокдаун сенсибилизированные рака яичников клетки olaparib [32]. Здесь мы обнаружили, что раковые клетки CTIP обедненного грудь показать повышенную чувствительность к ингибиторам PARP olaparib и veliparib. В соответствии с основной дефект в DDR, миРНК таргетинг CTIP вызвало сопутствующее увеличение и сохранение в формировании γH2AX и нарушение ДНК повреждения, вызванного Rad51 очагов формирования. Это предполагает, что причиной PARP ингибитора чувствительности в клетках обедненный CTIP может включать дефект в ДНК конечного резекции, что привело к неблагополучной HR. Кроме того, мы показали, двойной потери 53BP1 и CTIP может привести к сопротивлению к PARP ингибитора по сравнению с потерей CTIP. Дефицит CTIP нанесло серьезный дефект HRR, вероятно, в процессе инициации и дефицит 53BP1 под CTIP бросовой состоянии может частично спас HRR но есть дефект в ремонте NHEJ. Это условие, таким образом, привело к несколько более низкой выживаемости по сравнению с дефицитом в одиночку 53BP1, где NHEJ неисправен, но HR является активным. Это наблюдение согласуется с идеей, что 53BP1 сотрудничает с RIF1 и PTIP способствует NHEJ ремонт [41] и, таким образом, его отсутствие отрицательно сказывается на чувствительность к PARP ингибитора в MCF-7 клеток.
Человек CTIP является ядерным белком, который широко экспрессируется в различные ткани человека [42]. Это фосфорилируется при повреждении ДНК (возможно, ATM / ATR), сотрудничает с Mre11-Rad50-Nbs1 сложных и BRCA1 в обрабатывающей DSB разорванных концов [14,43, 44]. Это способствует HR инициируя DSB конец резекция и формирование одноцепочечной ДНК [30]. Наконец RAD51-онДНК нуклеопротеин нить сформирована для содействия нити вторжение и HR. При отсутствии BRCA1 или CTIP, RAD51 связывания с сайтов DSB и процесс HR которые мешали, в результате чего мутагенного репарации ДНК, геномной нестабильности и онкогенеза [45]. В CTIP-дефицитных мышей, раннее эмбриональное летальность и сокращается продолжительность жизни наблюдается с развитием различных типов опухолей [46]. Кроме того, недостатком CTIP было установлено, что связано со значительным увеличением частоты мутаций в скрининга исследовании рака толстой кишки [47]. С мутационного скрининга гена CTIP в 89 линиях человека опухолевых клеточных, 5 и 11 Миссенс молчащих мутаций были найдены [48]. Между тем, сообщалось, что уровень белка CTIP часто был довольно низким в клетках рака молочной железы, особенно в рецептора эстрогена отрицательной рака молочной железы [24]. Кроме того, недавнее исследование показало, что CTIP также широко мутировал у пациентов с МДС (MDS) и острого миелоидного лейкоза (ОМЛ) (MDS / ОМЛ) [49]. Все эти данные показывают, что CTIP играет важную роль в туморогенеза.
В заключение, CTIP часто подавляется в клетках рака молочной железы, и наши исследования показали, что уровень экспрессии CtIPin больных раком молочной железы коррелирует с общей выживаемостью. Потеря CTIP приводит HRR дефекта, обеспечивая обоснование расследовать клиническое значение CTIP и его потенциальное использование в качестве биомаркеров для применения ингибиторов PARP в лечении рака молочной железы.

Результаты (русский) 3:

обсуждение ", в последние годы несколько ингибиторов PARP были разработаны и объектом клинических испытаний для лечения рака [d].с помощью ингибиторов PARP как синтетический смертоносного подход представляет собой мощный новой стратегии терапевтического вмешательства [39, 40).недавно лин и др.показал, что ctip бросовым знали яичников раковых клеток olaparib [32].здесь,мы обнаружили, что ctip обедненный клеток рака молочной железы показать повышение чувствительности к ингибиторам PARP olaparib и veliparib.в соглашении с основной дефект рдр, sirna против ctip вызвало одновременное повышение и сохранение в гамма h2ax формирования и ограниченной повреждение днк искусственных rad51 очагов образования.это свидетельствует о том, что причиной PARP чувствительность клеток без ctip может быть связано с дефектом в конце резекция днк, в результате чего (ч.мы также показали дважды потери 53bp1 и ctip может вызвать сопротивление PARP по сравнению с потерей ctip.в ctip недостаток вызывает серьезные hrr дефект, наверное, в начале процесса,и 53bp1 дефицита по ctip их состояние может частично спасла hrr, но есть дефект nhej ремонта.это условие, таким образом, в результате несколько ниже по сравнению с 53bp1 выживания дефицита в одиночку, где nhej повреждена, но HR, активно.такое наблюдение согласуется с мнением о том, что 53bp1 сотрудничает с rif1 и ptip способствует nhej ремонт [41] и, таким образом, его отсутствие сказывается на чувствительность к PARP с клетками MCF - 7.
прав ctip является ядерной белков, которые широко выражено в различных человеческих тканей [42].это phosphorylated после повреждения днк (возможно, с помощью банкоматов ATR),