Результаты (
русский) 2:
[копия]Скопировано!
Примечание: Текст на основе автоматических оптического распознавания процессов. Пожалуйста, используйте PDF версию для юридических вопросах Expanded кровать Адсорбция системы Область изобретения EBA является аббревиатурой для расширенного кровать адсорбции. Эта технология используется в фармацевтических и диагностических промышленности для очистки И.А., белков и пептидов из огромного количества различных экстрактов и сырья. Настоящее изобретение относится к различным разработкам в известной технологии EBA. ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ Традиционный способ очистки для смеси, содержащей один или несколько молекул-мишеней может быть очистка на колонне с насадкой (т.е. не EBA), однако это требует нескольких оперативные меры таких а фильтрование и центрифугирование и число шагов в целях обеспечения того, примеси и частицы удаляются перед тем как смесь наносят на подходящем насадочной колонне. Эти шаги необходимы для того, чтобы избежать, что упакованы колонна забивает. В насадочной колонне, данное хроматографическую среду присутствует на связывание молекулы (ы), которые являются мишенью для очистки. Это хроматографическую среду могут быть адаптированы к различных целей очистки. Основной принцип EBA, чтобы сохранить хроматографической среды псевдоожиженного и тем самым позволяют частицам проходить через колонку. При использовании технологии EBA, это во многих случаях можно избежать вышеупомянутых оперативные меры перед нанесением сырья в колонну. Таким образом, время и затраты на эти процессы сводятся делает EBA ценным технология, которая экономически рекомендуется для очистки бесчисленного количества молекул. Это сокращает время и затраты на много оборудования. Для того, чтобы использовать технологию EBA, столбец EBA и подходящий хроматографическую среду должны быть использованы. Краткое изложение шагов, используемых в технологии EBA будет дано в следующем. 1 , Адекватное количество хроматографической среды помещают в колонку EBA. 2. Поток через посредство снизу и вверх через среду инициируется. Среду псевдоожиженным. 3. Среду промывают в колонне и концентрация соли и рН установлены. 4. Сырье подается. Среда связывает целевой moiecule (ы). 5. Оставшееся сырье промывают из колонны. 6. В колонку. Матрица осаждают. 7. Жидкость над средой сливают. 8. Молекула-мишень элюируют с носителя. 9. Промывка и регенерация хроматографической среды (при необходимости). Стадии 1-5 и 9 выполнены в режиме расширенного слоя. На стадии 6, поток остановился в шаге 7, жидкость сливают через дно, и на шаге 8, поток идет сверху вниз, то есть в упакованном режиме. Перед сырье наносили на колонку, он должен обеспечивается, что расширение стабильно. Это может быть сделано визуально или путем определения теоретических основания ("Расширенное кровать Адсорбция" от Pharmacia Biotech, страница 14). Двойной определение не должно отклоняться более чем на 20%. Во время визуального осмотра, либо каналы и струйные течения находятся. Если среда движется в узком кругу, и местные ручьи и каналы реактивные не наблюдается, то считается стабильно расширяется. Под термином струйных течений понимается четкое поток жидкости и, следовательно, средний локально в столбце EBA. Если реактивная струя течет вверх в одном месте, он обычно стекать вниз по другой. Дополнительная информация о технологии EBA можно найти в книге "Расширенной кровать адсорбции" по Pharmacia Biotech. Хроматографической среды В ЕБА технологии, только плотность контролируется частицы, которые могут адсорбировать данную молекулу-мишень используются. Плотность и диаметр среды определить степень потока, к которому частицы могут быть подвержены без вымываются из колонки. Частицы предпочтительно являются стороной. Диаметр пропорциональна квадрату скорости падения. Это означает, что две сферы одинаковой плотности не обязательно падают с одинаковой скоростью. Скорость падения пропорциональна разности плотности между жидкостью и материала, из которого сфера производства с мощностью одного, демонстрируя большое значение диаметра. В жидкостной хроматографии при низком давлении, многие виды хроматографической среды используют , Эти носители могут либо иметь более высокую плотность, чем окружающие жидкости в этом случае среда будет осаждаться, или меньшую плотность, чем окружающий жидкости в этом случае среда будет плавать. Одним из примеров таких частиц модифицированного плотности и их применение в псевдоожиженном столбцов описано в WO 92/00799. В упакованном колоночной хроматографии, носитель, который не контролируется плотность используется. На практике, вода будет проходить под в верхней части колонны таким образом, что жидкость протекает сверху вниз. Носитель будет двигаться в том же направлении, что и поток жидкости. В то же время, количество среды ограничено в среду в данной точке упакуют так, что жидкость не может течь свободно. Другим фактором, определяющим, будет ли среда блок вниз трудно или не является скорость, при которой жидкость проходит через колонку, т.е. потока жидкости. ДК / ЕР 0538350 Т3 раскрывает хроматографические частицы адсорбционные того, ковалентно связанного с ним по меньшей мере, одного активного вещества для связывания Молекулы в жидкой в процессе хроматографического жидкости слоем. Эти частицы адсорбции образуются из пористого композиционного материала с порами, разрешающей доступ к указанным молекул к внутренней части композитного материала. Сферы могут быть получены, имеющих заданную плотность и диаметр. Плотность контролируется путем включения одного или нескольких инертных частиц в хроматографической среды, количество, материал и процент инертных частиц, существенным для конечной плотности хроматографической среды. Кроме того, размер пор можно регулировать. Частицы плотности контролируемой можно рассматривать как инертные тяжелых / легких частиц, покрытых гидрофильным слоем, конгломерат соединением, таким как агарозном слоем различной концентрации и, следовательно, размер пор. См рис. 1а в течение двух примеров описанных сферах. Здесь два вида продукции, которые продаются сегодня представлены. Матрица Streamline по Pharmacia Biotech, Швеция, и авансом матрицы авансом хроматографии A / S, Дания. Они были получены в соответствии с тем же принципом, с одним или более частиц внутри сферы агарозы. В книге "Расширенное кровать Адсорбция" б Pharmacia, Швеция, раскрывает, что размер и плотность индивидуального сферы при данном расходе помещает сферу на конкретной позиции в колонке. Небольшие и легкие шары будут двигаться в верхней части расширенной матрицы, а крупные частицы, тяжелые будет двигаться в направлении нижней части. Результатом является то, что частицы оседают на их идеальном положении после соответствующего периода времени. Когда это произошло, расширение будет стабильным. Колонны ДК / EP 0538350 T3 раскрывает реактор жидкий кровать в вниз / восходящего потока жидкости реактора с псевдоожиженным слоем, содержащий вертикальный реактор контейнер с входом, выходом, псевдоожиженный слой частиц хроматографического адсорбента частицы и средства для инициирования движения, которые расположены рядом с или в псевдоожиженном слое в частиц, который находится ближе всего к входе жидкости. Существует смешанный зона, т.е. зона перемешивания, размер которой определяется степенью перемешивания жидкости и количества матрицы в контейнере реактора. Выше / ниже этой зоны не является смешанная зона, в которой так называемый поток вилки достигается. К потоку Термин вилка понимать движение жидкости в виде полосы через контейнер, а следовательно, и через матрицу. Примером такого контейнера реактора это авансом колонки 20 ™, который является восходящим потоком реактора разработан авансом Chromatografy A / S , Копенгаген, Дания. См рис. 1 и 2 для строительства его и примеры применения в псевдоожиженном и упакованы режиме, соответственно. Этот реактор контейнер сконструирован таким образом, что опорная сеть с размером пор 50 мкм находится в нижней части. Ниже опорной сети является впускные / выпускные который в основном используется в качестве выхода во врем элюции. Ось двигателя, на котором мешалка прикреплена распространяется вниз середина этой сети. Скорость мешалки можно варьировать. Перемешивание происходит только, когда поток приходит через колонку. Во элюции мешалку останавливают. Прямо над опорной сети является сторона впуска находится. Здесь все жидкость подается, когда матрица должна быть и была псевдоожиженным. Это может быть входное открывается и закрывается путем скольжения впускной клапан в или из колонны труб. Колонна труб является боросиликатное труба 20 мм. Фактическое поступление происходит через четыре круглые отверстия диаметром 3 мм, расположенных друг в той части впускного клапана, который находится внутри колонны труб. Клапан закрыт в конце и четыре круглые отверстия распределены в том же поперечном сечении в двух осей, расположенных под углом 90 градусов друг к другу. Колонка труба длиной 50 см (высокие) и на его стороне масштаб таким образом, чтобы включить чтение расширения матрицы в любое время. Кроме того, колонна снабжена поплавковым адаптера, авансом поплавка, который обеспечивает нежное и хорошее распределение элюирующего буфера во время извлечения. В верхней выпускной / впускной. Каждый впускной и выпускной снабжена клапанами, на которых соответствующими шлангами смонтированных. Буфер и сырье поступает в колонну с равномерной потока. Обычно матрица будет 1/3 высоты колонны. В этом случае, можно расширить до 3 раз. В зависимости от типа частиц / матрица, применяемых, поток может варьироваться от 6 колонке см / мин до 900 столбца см / мин. Зона перемешивание варьируется от 2-20 см. В этом описании термин зона перемешивание следует понимать как точно высоте в колонне, при которой перемешивание жидкости и матрицы происходит. Ан вязкость
переводится, пожалуйста, подождите..
