Illustration of ion exchange chroma

Illustration of ion exchange chromatography. The top panel shows the chromatogram from apurifi cation of a GST-fusion protein. Although the initial affi nity purifi cation step with glutathione wasrelatively pure, there are contaminating bands at ~28, ~66 and ~75 kDa. A column packed with a strong cationexchanger (MonoS®) was used to bind the target protein and a gradient of 0–100% 1 M NaCl in HEPES (pH8.0) was applied using an ÄKTA HPLC system. Analysis of the isolated fractions show highly pure target proteinin fractions 11–13, as judged by Coomassie Brilliant Blue staining.

Результаты (русский) 1:

Иллюстрация ионообменной хроматографии. На верхней панели показана хроматограмма очистки GST-слитого белка. Хотя первоначальная стадия аффинной очистки с глутатионом была относительно чистой, имеются примесные полосы при ~28, ~66 и ~75 кДа. Для связывания целевого белка использовали колонку, наполненную сильным катионообменником (MonoS®), и применяли градиент 0–100% 1 М NaCl в HEPES (рН 8,0) с использованием системы ÄKTA HPLC. Анализ выделенных фракций показывает высокую чистоту целевого белка во фракциях 11–13, что подтверждается окрашиванием Кумасси бриллиантовым синим.

Результаты (русский) 2:

Ионная хроматография. Верхняя панель показывает
Очистить катионы слияния белков GST. Несмотря на то, что первые этапы аффинизации глютатина
Относительно чистые, есть загрязненные зоны в ~ 28, ~ 66 и ~ 75 кД. Колонна, заполненная сильными катионами
Коммутаторы (MonoS®) используются для связывания градиентов (pH) 0 - 100% NaCl в белках - мишенях и HEPES
8.0). Анализ отдельных уровней показал высокую чистоту белка - мишени
Определяется по ярко - синему окрашиванию комаса, в 11 - 13 баллов.

Результаты (русский) 3:

Ионный обмен хроматографией. В верхней панели показано, что
Очистка протеина слияния GST. Несмотря на то, что первоначальный этап очистки глютафосата
Относительно чистый, имеет зоны загрязнения в диапазоне около 28, ~ 66 и ~ 75 кДА. Колонны, заполненные сильными катионами.
Коммутатор (MonoS) для связывания белка-мишени и ГПЕС (pH) с градиентом 0-100% 1М NaCl
8.0) Измерение проводилось с использованием системы высокоэффективной жидкой хроматографии KTA. Анализ классов изоляции показал высокую чистоту целевого белка
Судя по яркому синему окраску Комаса в составе 11-13.